實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)利用紫外光、可見(jiàn)光、紅外光和激光等測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜,利用此吸收光譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方法,稱為分光光度法或分光光度技術(shù),使用的儀器稱為分光光度計(jì),這種分光光度計(jì)靈敏度高,測(cè)定速度快,應(yīng)用范圍廣,其中的紫外/可見(jiàn)分光光度技術(shù)更是生物化學(xué)研究工作中*的基本手段之一。
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)操作規(guī)程:
1.選定波長(zhǎng):根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。
2.預(yù)熱儀器:接通電源開(kāi)關(guān),開(kāi)啟樣品室暗箱蓋,模式處于T狀態(tài)下預(yù)熱20分鐘;(為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將光路斷開(kāi))。
3.將裝有參比溶液和被測(cè)樣品的比色皿依次置于樣品室中(參比置于*個(gè)格)。
4.調(diào)節(jié)“T=0%”點(diǎn):開(kāi)啟樣品室暗箱蓋,T應(yīng)為0%,否則調(diào)“0%T”按鍵使T顯示為0000。
5.調(diào)節(jié)T=100%:合上樣品室暗箱蓋,并使參比溶液置于光路,此時(shí)T應(yīng)為,否則調(diào)節(jié)“100%T”按鍵,使指針指在T=100%。(注意:不測(cè)定時(shí),應(yīng)切斷光路(開(kāi)啟暗箱蓋),防止光照長(zhǎng)時(shí)間照射檢測(cè)器)。
6.樣品的測(cè)定:把模式設(shè)置為A,將樣品液依次處于光路中,分別記下被測(cè)樣品的吸光度。
7.測(cè)量完畢,及時(shí)取出比色皿,洗干凈后倒置于濾紙上晾干,關(guān)掉電源。
8.填寫(xiě)儀器使用記錄表。